相信大家在小鼠实验过程中都遇到过,需要对小鼠进行编号分组的情况,都会纠结如何对这群长相一致、可爱的小鼠进行编号呢?编号清楚、容易辨识、操作简便、更重要的是动物福利哦!那我们该如何选择呢?下面小编就为大家带来几种简单的方法,这样你就可以不用慌啦!
一、断趾编号法
这种方法适用于出生小于等于7天脚趾完整的幼仔哦。除特殊表型如先天性脚趾畸形的品系。
操作方式:
单手抓取好小鼠翻转手心使小鼠腹面朝上面向自己,小鼠四肢张开。
编号方式:
小鼠左下、右下脚趾依次标记为1~10号,左上、右上脚趾依次标记为20~90号。剪断相应的脚趾则代表对应的号码,逢整百数不做标记。(如:83号小鼠标记为剪断对应的80号脚趾和3号脚趾。号小鼠标记为所有脚趾完好)
注意事项:断趾时,应剪断其一段趾骨,不能只断趾尖,以防伤口痊愈后辨别不清。小鼠左右脚趾的定义为,当小鼠腹部面向操作者时,以操作者的左右为标准,在操作者的左侧的为左,右侧的为右。
二、耳标器编号法:借助工具、简单方便
耳标器编号发适用于成年小鼠,除特殊表型如先天性耳朵溃烂的品系不适用哦。
操作方式:单手抓取好小鼠颈后部皮肤露出小鼠的耳朵,使小鼠腹部向下。(不同的耳标器也有不同的方法)
编号方式1:使用打孔器和手术剪在对应编号位置将小鼠耳朵标记耳洞或者剪成缺口状,小鼠左耳可标记“个位数”,小鼠右耳可标记“十位数”,逢整百数不做标记。如图所示:
在操作后超过小鼠的某一周期耳洞或缺口可能长好。并且,如果同窝小鼠打架可能撕裂耳洞和缺口。所以,在标记时定期检查耳朵以此确保动物仍能被准确的辨识很重要。
三、小鼠身份证—耳标
编号方式2:
使用耳标钳将带有数字的耳标直接打在小鼠的任意一个耳朵中间。根据耳标上的数字进行辨别。是不是很简单,有木有哈哈!
当然在打耳标时,耳标钳需尽量贴近小鼠耳根处,下手快准狠哦,不然小鼠也会疼的哟!这样就会避免小鼠将耳标挠掉,打耳标后隔天需观察耳标是否牢固,如果有松动或者脱落需要重新打耳标。
以上就是常用的几种小鼠标记方法,当然还有染色法、直接标记法、烙印法等等,随着科技的不断发展,也会有更多新的方法,比如在小鼠体内移植电子芯,当然每位实验人员可以根据实验需求来对小鼠进行标记,编号的方法也会有差异,只有根据自身的需求,选择合适的标记方法,才能最大程度保障动物的福利。
麻醉方法一、常用麻醉方法
(一)全身麻醉
麻醉药经呼吸道吸入或静脉、肌内注射时,产生中枢神经系统抑制,呈现意识消、疼痛消失、肌肉松弛和反射抑制等现象,这种方法称全身麻醉。其特点为抑制深浅与药物在血液中的浓度有关,当麻醉药从体内排出或在体内代谢破坏后,动物逐渐清醒,不留后遗症。
1、吸入麻醉法麻醉药以蒸汽或气体状态经呼吸道进入而产生麻醉者,称吸入麻醉,常用异氟烷做麻醉药。吸入法对多数动物有良好的麻醉效果。其特点是易于调节麻醉深度和较快的终止麻醉。
2、注射麻醉法包括肌肉给药、腹腔给药和静脉给药。非挥发性和中药麻醉剂均可用作腹腔和静脉注射麻醉。操作简便,是动物实验室最常采用的方法之一。腹腔给药麻醉多用于大鼠、小鼠和豚鼠,较大的动物如兔、狗等则多用静脉给药进行麻醉。常用的麻醉药有戊巴比妥钠、硫喷妥钠、氨基甲酸乙酯等。在麻醉兴奋期出现实时,动物挣扎不安,为防止注射针滑脱,常用吸入麻醉法进行诱导,待动物安静后再进行腹腔或静脉穿刺给药麻醉。在注射麻醉药物时,先用麻醉药总量的2/3,密切观察动物生命体征的变化,如已达到所需麻醉的程度。余下的麻醉药则不用,,避免麻醉过深抑制延髓呼吸中枢,导致动物死亡,所以在注射麻醉时,一定控制药物的浓度和注射量。
(二)局部麻醉
用局部麻醉药阻滞周围神经末梢或神经干、神经节、神经从的冲动传导,产生局部性麻醉区,称为局部麻醉。其特点是动物保持清醒,对重要器官功能干扰轻微,麻醉并发症少,是一种比较安全的麻醉方法。适用于大中型动物的各种短时间实验。局部麻醉操作方法很多,可分为表面麻醉、局部浸润麻醉、区域阻滞麻醉以及神经干(丛)阻滞麻醉。
1、表面麻醉利用局部麻醉药的组织穿透作用,通过黏膜阻滞表面神经末梢,称为表面麻醉。在口腔及鼻腔黏膜、眼结膜、尿道等部位手术时,常把麻醉药涂敷、滴入、喷入表面,或尿道灌注给药,使之麻醉。
2、区域阻滞麻醉在手术区四周和底部注射麻醉药阻断疼痛的向心传导,称为区域阻断麻醉。常用药为普鲁卡因。
3、神经干(丛)阻滞麻醉在神经干(丛)的周围注射麻醉药,阻滞其传导。使其所支配的区域无疼痛,称神经干(丛)阻滞麻醉。常用药为利多卡因。
4、局部浸润麻醉沿手术切口逐层注射麻醉药,靠药夜的张力弥散,浸入组织,麻醉感觉神经末梢,称局部浸润麻醉,常用药为普鲁卡因。在实行局部浸润麻醉时,先固定好动物,用0.5%~1%的盐酸普鲁卡因皮内注射,使局部皮肤表面呈现桔皮样隆起,称为皮丘,然后从皮丘进针,向皮下分层注射,在扩大浸润范围时,针尖儿应从浸润过的部位刺入,直至要求麻醉区域的皮肤都浸润为止。每次注射时必须先抽注射器,以免将麻醉药注入血管内引起中毒反应。
二、麻醉和镇痛的区别
麻烦(anesthesia)是用药物或其他方法使动物整体或局部暂时失去知觉,以达到无痛目的进行手术治疗。传统麻醉概念是可逆性意识消失,现代麻醉概念已经细化,目前区分出了镇静、催眠、阵痛、肌松、抑制有害刺激反应等多种成分。麻醉的目的是消除实验过程中动物的疼痛和紧张感觉,使动物保持安静,保障实验动物的安全。使动物在实验中服从操作,确保实验顺利进行。
镇痛(acesodyne)可缓解或消除疼痛,是麻醉的组成部分,属机体对伤害性刺激反应的组成部分,是麻醉必须的辅助措施。阵痛时动物大多处于有意识状态。镇痛主要通过三种途径:改善痛源,改变中枢的痛感受和阻断痛觉在中枢神经系统中的传递。
麻醉意外及处理方法麻醉意外是指因麻醉造成的动物死亡或严重的组织损伤和致残。麻醉意外可导致动物血压极速下降甚至测不到,睫毛反射消失,呼吸极慢而无规则,甚至呼吸停止等临床死亡症状,应立即进行急救。急救方法可根据动物情况而定,对狗、兔、猫常用的急救措施有下面几种。
1、针刺针刺唇上鼻下(相当于人类的人中穴)对挽救家兔效果较好。对狗用每分钟几百次频率的脉冲电刺激膈神经效果较好。
2、注射强心剂可以静脉注射0.1%肾上腺素1ml,必要时直接做心脏内注射。肾上腺素具有增强心肌收缩力,使心肌收缩幅度增大与加速房室传导速度、扩张冠状动脉、增强心肌供血、供氧及改善心肌代谢、刺激高位及低位心脏起搏点等作用。当动物注射肾上腺素后,如心脏已搏动但极为无力时,可以静脉或心腔内注射1%氯化钙5ml。钙离子可兴奋心肌紧张力,而使心肌收缩加强、血压上升。
3、注射呼吸中枢兴奋药可从静脉注射山梗菜碱或尼可刹米。
1)尼可刹米:每次狗一次注射浓度为25%的药物1ml。此药可直接兴奋延髓呼吸中枢,使呼吸加速加深,对血管运动中枢的兴奋作用较弱,在动物抑制情况下作用更明显。
2)山梗菜碱:每只狗一次注射浓度为1%的药物0.5ml。此药可刺激颈动脉体的化学感受器,反射性地兴奋呼吸中枢,同时此药对呼吸中枢还有轻微的直接兴奋作用。作为呼吸兴奋药,其作用迅速而显著,呼吸可迅速加深加快,血压亦同时升高。
3)动脉快速注射高渗葡萄糖液:一般常采用经动物股动脉逆血流加压、快速、冲击式注入40%葡萄糖溶液。注射量根据动物而定,如狗可按2~3ml/kg体重计算。这样可刺激动物血管内感受器,反射性地引起血压呼吸的改善。
4)动脉快速输血、输液:在做失血性休克或死亡复活等实验室时采用。可在动物股动脉插一软塑套管,连接加压输液装置(血压计连接输液瓶上口,下口通过胶皮管连接塑料套管),当动物发生临床死亡时即可加压(~mmHg),快速从股动脉输血和低分子右旋糖酐。如实验前动物曾用肝素抗凝,由于微循环血管中始终保持通畅,不出现血管中血液凝固现象,因此就是动物出现临床死亡后数分钟,采用此种急救措施仍易救活。
5)人工呼吸:可采用双手压迫动物胸廓进行人工呼吸。如有电动人工呼吸器,可行气管分离插管后,再连接人工呼吸器进行人工呼吸。一旦见到动物自动呼吸恢复,即可停止人工呼吸。
动物的常规解剖学认识(1)
运动系统主要分为骨和骨骼肌。
“在进行动物实验之前,需要对常规动物解剖部位有一个大致的认识与了解,找准每个组织或器官对应的部位。为方便描述,本文以大鼠为例,从以下9大解剖系统进行简要介绍。
”本章节图片(除标注外)来自文献,经威斯腾生物整理及标注。
一、运动系统
大鼠整体骨骼左前面观
大鼠整体骨骼侧面观
1肋骨rib
2胸椎thoracicvertebra
3颈椎cervicalvertebra
4颅骨cranium
5肩胛骨scapula
6肱骨hiimeius
7桡骨radius
8尺骨ulna
9掌骨metacarpalbone
10指骨digitalbone
11腰椎lumbarvertebra
12髂骨ilium
13尾骨coccyx
14股骨femur
15髌骨patella
16腓骨fubula
17胫骨tibia
18跖骨metatarsalbone
19趾骨digitalbone
常用造模骨的分类介绍:
头骨关键部位:矢状缝、冠状缝、前囟、后囟
此部位常用于大鼠脑定位注射类造模。
椎骨:大鼠的脊柱由57-61块脊椎骨组成,包括颈椎7(C1~C7)、胸椎13(T1~T13)、腰椎6(L1~L6)、荐锥4、尾锥27~31块。
此结构相关常见模型:胸椎T10脊髓横断、L3~L6腰椎间盘退变
胸骨:共分为6节,最前一节为胸骨柄,第二到第五节称为胸骨体,最后一节为剑突。
肋骨:保护肺、心脏、肝脏等器官的骨骼,是整个胸腔的构架。左右各13条,后端皆与胸椎相连。
心肌缺血模型需打开第3~4根肋骨暴露心脏。
肩胛骨:位于胸廓的后面,是倒置的三角形扁骨,介于第2~7肋之间,后面有一横行的骨嵴,称肩胛冈,其外侧角肥厚,有梨形关节面,称关节盂。
此结构常见模型:肩关节盂唇移植术。
股骨、胫骨:常用于细胞实验,培养BMSC细胞。
动物的常规解剖学认识(2)
本章节图片(除标注外)来自文献,经威斯腾生物整理及标注。
二、消化系统
消化系统主要由口腔、食管、胃、小肠、大肠、肝脏、消化腺组成。
其中小肠分为:十二指肠、空肠、回肠。大肠分为:盲肠、结肠(升、横、降)、直肠。
肝脏分叶:左外叶、左中叶、中叶、右叶、尾状叶和两个盘状的乳头状突,每叶都是中心厚,边缘薄。
消化系统常见模型:
肠道埋管给药、急性胰腺炎、肝纤维化、结肠UC、脓毒血症等。
三、呼吸系统
呼吸系统主要分为上呼吸道及下呼吸道、肺。
上呼吸道分为:鼻、咽、喉
下呼吸道分为:气管(位于食道的腹侧)、支气管及肺内的各级支气管的分支肺的分叶:分左、右两肺,左二右三,共五叶。
呼吸系统常见模型:
LPS/OVA气道/滴鼻吸入致敏哮喘模型、肺癌原位移植、变应性鼻炎等
四、泌尿系统
泌尿系统由肾脏、输尿管、膀胱和尿道组成。
肾:位于腹腔两边,其前缘位于第一腰椎水平处,后端位于第三腰椎水平处,营养好的大鼠,在肾的内侧和外侧常常围绕着大量脂肪,肾表面有致密的结缔组织构成的纤维膜。
膀胱:位于下腹部,生殖器上方。
相关应用有脊髓横断手术后人工辅助排尿。
泌尿系统常见模型
I/II型糖尿病、兔尿道移植等。
五、生殖系统
雄性生殖器官由睾丸、附睾、输精管、阴茎、附性腺及阴囊组成。
附睾:分为附睾头、附睾体、附睾尾三部。位置及形态:附睾头呈半月状覆盖在睾丸头端;附睾体狭细,位于睾丸内侧;附睾尾呈棒状,越过睾丸尾端向后延伸11-13毫米与输精管相连续。
雌性生殖器官由下列各部构成:卵巢、输卵管、子宫、阴道。
卵巢:性成熟的雌鼠卵巢呈卵圆形,表面有不规则结节状的卵泡,新鲜卵巢呈淡红色。
子宫:大鼠的子宫属于双子宫形,两个子宫角的腔是完全分开的。两个子宫外口独立地开口于阴道,并深深地埋在突入阴道的4-5个粘膜褶内,这些粘膜褶突入阴道腔成为子宫阴道部。
生殖系统常见模型
复发性流产、自然衰老、卵巢癌等。
胸、腹腔器官
Theorgansinthethoracicandabdominalcavities
1胸腺thymus
2心heart
3肺lung
4膈diaphragm
5十二指肠duodenum
6空肠jejunmn
7膀胱urinarybladder
8脾spleen
9结肠colon
10回肠ileum
11股静脉femoralvein
12前列腺prostate
腹腔器官(1)
Theorgansintheabdominalcavity(1)
1肝右中叶rightmiddlelobeofliver
2肝右外叶rightlaterallobeofliver
3小肠smallintestine
4大网膜greateromentum
5结肠colon
6胸腺thymus
7肺lung
8心heart
9膈diaphragm
l0肝左中叶leftmiddlelobeofliver
11肝左外叶leftlaterallobeofliver
12胃stomach
13脾spleen
腹腔器官(2)
Theorgansintheabdominalcavity(2)
1肝右中叶rightmiddlelobeofliver
2肝右外叶rightlaterallobeofliver
3小肠smallintestine
4肝左中叶leftmiddlelobeofliver
5肝左外叶leftlaterallobeofliver
6胃stomach
7附睾epididymis
8睾丸testis
9阴茎penis
10股动、静脉femoralarteryandvein
动物的常规解剖学认识(3)
本章节图片(除标注外)来自文献,经威斯腾生物整理及标注。
六、循环系统
循环系统主要由血液、血管、心脏、淋巴管道、淋巴器官和淋巴液组成,淋巴器官包括淋巴结、脾、胸腺和腭扁桃体等。
心脏:心脏是圆锥形的,表面光滑,外面包裹有一层心包,心尖为左心室。
血管主要分为动脉、静脉、毛细血管。
胸腺:大鼠的胸腺由两叶组成,呈不规则的分叶状,位于胸腔前纵隔,大小与结构随年龄的大小而变化。40-60日龄大鼠的胸腺最大,以后即停止生长,并逐渐退化。
循环系统常见模型:
心力衰竭、心肌梗死、肺动脉高压等。
七、内分泌系统
内分泌腺主要有脑垂体、松果体、甲状腺、甲状旁腺和肾上腺。
脑垂体:又名脑下腺,位于间脑腹面,视交叉后方,借垂体柄与丘脑下部相连。嵌在颅底基蝶骨的垂体窝内。背面紧贴在脑桥前方的一横沟内,大致成三角形,红褐色。
肾上腺:位于肾脏的前方内侧,和腰下肌的腹面相连,褐色,质地结实,右肾呈豆状,左肾呈卵园形,10周以上的大鼠肾上腺的显微结构才发育好。
八、感觉系统
感觉系统主要包括感受器、神经通路以及大脑中和感觉知觉有关的部分。
眼球:大鼠眼球的大小与其年龄、脑重成正比例生长,而与动物的体重无关,眼球的外层是三层膜构成的,即纤维膜,血管膜和视网膜,纤维膜是眼球最外层的一层被膜,可以分为前(角膜)后(巩膜)两部分,血管膜包含三部分:脉络膜、睫状体、虹膜。
眼部常见模型:眼内眦取血、视网膜缺血再灌注等
腹腔器官(3)
Theorgansintheabdominalcavity(3)
1膈diaphragm
2前腔静脉precavalvein
3胸腺thymus
4肺lung
5心heart
6肾上腺adrenalgland
7肾kidney
8肾门静脉renalportalvein
9精索内静脉internalspermaticvein
10髂腰静脉iliolumbarvein
11膀胱urinarybladder
腹主动脉及其分支
Theabdominalaortaandbranches
1直肠rectum
2膀胱urinarybladder
3前列腺prostate
4膈diaphragm
5后腔静脉postcavalvein
6腹腔动脉celiacartery
7肾动脉renalartery
8右肾rightkidkey
9前肠系膜动脉anteriormesentericartery
10精索内动脉internalspermaticartery
11输尿管ureter
12髂腰动、静脉iliolumbararteryandvein